細胞因子在體內(nèi)具有重要的病理作用，在感染、炎癥、自身免疫病、免疫缺陷疾病等狀態(tài)下，部分細胞因子會明顯變化，根據(jù)這些指標可以判斷機體的免疫功能。血清、血漿或組織液中細胞因子檢測可以對疾病診斷和治療做出相應評價,具有重要的應用價值。廣泛應用于細胞生物學、免疫學以及腫瘤學等領域的流式細胞術是細胞因子檢測的一種方法。

由于血清、細胞培養(yǎng)上清、積液中的細胞因子含量低，不容易檢測，加上樣本數(shù)量少，傳統(tǒng)的方法無法滿足多因子檢測。流式微球捕獲芯片技術（CBA）微量樣本多重蛋白定量技術，是用流式細胞儀對多重蛋白進行定量檢測的方法，能夠同時對樣本中的多個指標進行定性、定量檢測，可用于細胞因子檢測。

流式細胞儀技術（FCM）技術可以應用流式細胞儀，結(jié)合單克隆抗體技術、免疫熒光染

色技術，對快速流動液體中的單細胞進行多種參數(shù)測量和分析。CBA 檢測系統(tǒng)采用聚苯乙烯熒光微球連結(jié)特定的捕獲抗體，捕捉待測物，同時再加入待測物的熒光抗體，三者形成夾心復合物，通過流式細胞儀進行檢測。流式細胞術的優(yōu)點是同時可以進行多參數(shù)檢測，快速并且信息量大。

（1）能夠同時對單個樣本進行多種檢測

小鼠血清Th1／Th2／Th17 相關細胞因子是實驗中經(jīng)常會用到的檢測指標，由于血清量少很難運用傳統(tǒng)的方法如ELISA法進行多因子檢測，而CBA 法正好能解決這一問題，它能夠一次性對血清中的IL－2、IL－4、IL－6、IFN－Υ、TNF、IL－10、IL－17A進行定量檢測。美迪西可以為廣大醫(yī)藥研發(fā)人員提供細胞因子及生物標志物的檢測服務，其生物分析部基礎設施齊全、儀器設備先進，擁有的流式CBA、MSD、Luminex系統(tǒng)等高/端技術平臺可以進行各種single plex或multiplex多形式的細胞因子和生物標志物的檢測。

（2）所需樣本量少、靈敏度高等

傳統(tǒng)ELISA方法每項實驗樣本用量50-200μl，而流式CBA檢測技術樣本用量少于50μl且分析靈敏度高達2.8pg/mL。對于稀有樣本，CBA只需少量樣本即可檢測細胞因子、抗體、抗原等多個指標。

（3）穩(wěn)定性好

CBA 穩(wěn)定性好、可重復性高，能避免酶聯(lián)免疫放大技術使信號失真導致的假陽性。

流式細胞術檢測用于細胞因子檢測是一種相對快速、重復性好并能準確定量的方法。但由于胞內(nèi)分析步驟復雜，涉及變異因素多，可能會出現(xiàn)結(jié)果不穩(wěn)定，較難重復等問題。

如在檢測血清時，由于血清成分復雜，細胞因子含量差距大，實驗中經(jīng)常會出現(xiàn)分群不明顯、微球聚集、濃度太低等現(xiàn)象，對實驗結(jié)果造成很大影響。如流式CBA法的微球由聚苯乙烯材料制作而成，血清加入微球之后如果沒有充分渦旋，容易沉淀聚集，細胞因子不能充分跟微球結(jié)合，導致多群甚至聚集現(xiàn)象發(fā)生，檢測結(jié)果將是無效的。需要從制備混合微球開始到加入實驗管，直到上機檢測前每一步都必須充分渦旋，以避免微球發(fā)生聚集。

而且CBA操作過程繁瑣，對實驗人員技術要求高，從一定程度上限制了其廣泛使用。因此在具體實驗過程中，需要多次摸索，結(jié)合實驗中所遇到的問題進行分析，找出解決問題的辦法，并在今后實驗中規(guī)避實驗中的一些問題的出題，來提高實驗的有效性和準確性。