微生物是對藥品原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品造成污染的重要因素，也是造成生產(chǎn)失敗、成品不合格、對人類造成危害的重要因素。因此，分離得到的污染微生物，進行微生物鑒定，是十分必要的，也可為檢驗和生產(chǎn)提供有效的依據(jù)。

1、形態(tài)學特征

(1)細胞形態(tài)

在顯微鏡下觀察細胞外形大小、形狀、排列等，細胞構(gòu)造，革蘭氏染色反應(yīng)，能否運動、鞭毛著生部位和數(shù)目，有無芽孢和莢膜、芽孢的大小和位置，放線菌和真菌的繁殖器官的形狀、構(gòu)造，孢子的數(shù)目、形狀、大小、顏色和表面特征等。

(2)群體形態(tài)

群體形態(tài)通常是指以下情況的特征：

在一定的固體培養(yǎng)基上生長的菌落特征：包括外形、大小、光澤、黏稠度、透明度、邊緣、隆起情況、正反面顏色、質(zhì)地、氣味、是否分泌水溶性色素等。

在一定的斜面培養(yǎng)基上生長的菌苔特征：包括生長程度、形狀、邊緣、隆起、顏色等;在半固體培養(yǎng)基上經(jīng)穿刺接種后的生長情況。

在液體培養(yǎng)基中生長情況：包括是否產(chǎn)生菌膜，均勻渾濁還是發(fā)生沉淀，有無氣泡，培養(yǎng)基的顏色等。如是酵母菌，還要注意是成醭狀、環(huán)狀還是島狀。

2、生理生化反應(yīng)特征

(1)利用物質(zhì)的能力

包括對各種碳源利用的能力(能否以CO2為唯yi碳源、各種糖類的利用情況等)、對各種氮源的利用能力(能否固氮、硝酸鹽和銨鹽利用情況等)、能源的要求(光能還是化能、氧化無機物還是氧化有機物等)、對生長因子的要求(是否需要生長因子以及需要什么生長因子等)。

(2)代謝產(chǎn)物的特殊性

這方面的鑒定項目非常多，如是否產(chǎn)生H2S、吲哚、CO2、醇、有機酸，能否還原硝酸鹽，能否使牛奶凝固、凍化等。

(3)與溫度和氧氣的關(guān)系

測出適合某種微生物生長的溫度范圍以及它的Z適生長溫度、Zdi生長溫度和Zgao生長溫度。對氧氣的關(guān)系，看它是好氧、微量好氧、兼性好氧、耐氧還是專性厭氧。

3、生態(tài)學特征

生態(tài)學特征主要包括它與其他生物之間的關(guān)系(是寄生還是共生，寄主范圍以及致病的情況)。在自然界的分布情況(pH情況、水分程度等)、滲透壓情況(是否耐高滲、是否有嗜鹽性等)。

4、血清學反應(yīng)

很多細菌有十分相似的外表結(jié)構(gòu)(如鞭毛)或有作用相同的酶(如乳酸桿菌屬內(nèi)各種細菌都有乳酸脫氫酶)。雖然它們的蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)各異，但在普通技術(shù)下(如電子顯微鏡或生化反應(yīng))，仍無法分辨它們。然而利用抗原與抗體的高度敏感特異性反應(yīng)，就可用來鑒定相似的菌種，或?qū)νN微生物分型。

用已知菌種、型或菌株制成的抗血清，與待鑒定的對象是否發(fā)生特異性的血清學反應(yīng)來鑒定未知菌種、型或菌株。該法常用于腸道菌、噬菌體和病毒的分類鑒定。利用此法，已將傷寒桿菌、肺炎鏈球菌等菌分成數(shù)十種菌型。

5、生活史

生物的個體在一生的生長繁殖過程中，經(jīng)過不同的發(fā)育階段。這種過程對特定的生物來講是重復循環(huán)的，常稱為該種生物的生活周期或生活史。各種生物都有自己的生活史。在分類鑒定中，生活史有時也是一項指標，如黏細菌就是以它的生活史作為分類鑒定的依據(jù)。

6、對噬菌體的敏感性

與血清學反應(yīng)相似，各種噬菌體有其嚴格的宿主范圍。利用這一特性，可以用某一已知的特異性噬菌體鑒定其相應(yīng)的宿主，反之亦然。

7、細胞壁組分分析

細胞壁組分分析首先應(yīng)用于放線菌分類中，把它作為區(qū)分“屬”的依據(jù)之一。它比單純用形態(tài)進行分類更全面。近年來，有人對18個屬的放線菌的細胞壁進行了分析，根據(jù)細胞壁的氨基酸組成，將其分為6個細胞壁類型，又根據(jù)細胞壁的糖的組成分成4個糖類型，在此基礎(chǔ)上，結(jié)合形態(tài)特征提出了相應(yīng)的科屬檢索表。

8、紅外光譜

一般認為，每種物質(zhì)的化學結(jié)構(gòu)都有特定的紅外光譜。若兩個樣品的吸收光譜*相同，可以初步認為它們是同一種物質(zhì)。因此，紅外光譜技術(shù)被應(yīng)用到微生物的分類中。它先后對芽孢桿菌、乳酸菌、大腸桿菌、酵母菌進行分類，近年來又應(yīng)用于放線菌分類中。

根據(jù)有關(guān)學者的試驗表明，這種方法簡便快速，樣品少，結(jié)果較好，不僅可以初步了解各屬菌的細胞成分的化學性質(zhì)，同時也有助于微生物間系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系的探索。但是它也有不足之處，借助于紅外線光譜區(qū)分屬內(nèi)的種和菌株是困難的，但可以作為“屬”的分類特征。