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標準小牛血清解凍過程中應該注意什么
點擊次數(shù):2828 更新時間:2016-08-23

      血清 本文將以問答形式為您詳細介紹標準小牛血清在使用過程中一些常見問題,感謝您的關(guān)注。

  問題一:如何保存標準小牛血清

  對于標準小牛血清的保存,小編在這里建議長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。

  問題二:熱滅活血清的必要性分析

  對血清進行加熱可以滅活補體系統(tǒng)。啟動的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養(yǎng)ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。

  問題三:如何完好地解凍小牛血清

  小編建議您將小牛血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。這里有一點需要注意的就是融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。

  問題四:解凍后如何解決絮狀沉淀物

  標準小牛血清在解凍后會出現(xiàn)絮狀沉淀物,產(chǎn)生這一現(xiàn)象的原因有很多,但是zui普遍的還是血清中脂蛋白的變性所造成,血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的品質(zhì)。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。

  問題五:如何避免沉淀物的產(chǎn)生

  解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

  1、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。

  2、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的品質(zhì)。

  3、若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。

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