人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。所以今天詳細(xì)給大家分享一下有關(guān)原代細(xì)胞的取材，想了解的小伙伴往下看喲~
 

       一、取材的基本要求

 

　　1.取材要注意新鮮和保鮮
 

　　2.應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌
 

　　3.防止機(jī)械損傷
 

　　4.去除無(wú)用組織和避免干燥
 

　　5.應(yīng)注意組織類(lèi)型、分化程度、年齡等
 

　　6.作好記錄
 

　　二、各類(lèi)組織的取材技術(shù)
 

　　皮膚和粘膜的取材
 

　　內(nèi)臟和實(shí)體瘤的取材
 

　　血液細(xì)胞的取材
 

　　骨髓、羊水、胸/腹水細(xì)胞取材
 

　　動(dòng)物組織取材
 

　　人胚體組織取材
 

　　雞(鴨)鳥(niǎo)類(lèi)胚胎組織取材
 

　　皮膚和粘膜的取材
 

　　主要取自于手術(shù)過(guò)程中的皮片，方法似外科取斷層皮片手術(shù)操作，但面積一般2~4c㎡。
 

　　內(nèi)臟和實(shí)體瘤的取材
 

　　內(nèi)臟除消化道外基本是無(wú)菌的，但取材時(shí)要明確和熟悉所需組織的類(lèi)型和部位，實(shí)體瘤取材時(shí)要取腫瘤細(xì)胞豐富的區(qū)域，要避開(kāi)破潰、壞死液化部分，以防污染，盡量去除混雜的結(jié)締組織。
 

　　血液細(xì)胞的取材
 

　　血細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的取材，一般多抽取靜脈外周血，或從淋巴組織中(如脾、扁桃體、胸腺、淋巴結(jié)等)分離細(xì)胞，取材時(shí)應(yīng)注意抗凝。
 

　　骨髓、羊水、胸/腹水細(xì)胞取材
 

　　嚴(yán)格無(wú)菌，注意抗凝，還要盡快分離培養(yǎng)，離心后，用無(wú)鈣、鎂PBS洗兩次，再用培養(yǎng)液洗一次后即可培養(yǎng)，不宜低溫存放。
 

　　動(dòng)物組織取材
 

　　鼠胚組織取材
 

　　首先用引頸或氣管窒息致死法處死孕期合適的動(dòng)物，然后將其整個(gè)浸泡在含有75%酒精的燒杯中，5min后(注意時(shí)間不能太長(zhǎng)，以避免酒精從口或其他通道進(jìn)入體內(nèi)，影響組織活力)，取出動(dòng)物，在消毒過(guò)的木板上可用無(wú)菌的圖釘或大頭針固定四肢，切開(kāi)皮膚，用無(wú)菌操作法解剖取胚或用無(wú)菌止血鉗挾起皮膚、用無(wú)菌眼科剪沿軀干中部環(huán)形剪開(kāi)皮膚，用止血鉗分別挾住兩側(cè)皮膚拉向頭尾，把動(dòng)物反包，暴露軀干，然后再固定，更換無(wú)菌解剖器材，采用無(wú)菌操作法解剖取出胚胎。
 

　　幼鼠胚腎(或肺)取材
 

　　幼鼠采用上述方法處死消毒后，腹部朝上固定在木板上，先切開(kāi)游離毛皮并拉開(kāi)至兩側(cè)：然后采用無(wú)菌法打開(kāi)胸腔取肺，或背部朝上固定在木板上，先將背部毛皮切開(kāi)游離并拉向兩側(cè)，然后采用無(wú)菌法從背部打開(kāi)腹腔取腎。
 

　　人胚體組織取材
 

　　取材方法與鼠類(lèi)相同
 

　　雞(鴨)鳥(niǎo)類(lèi)胚胎組織取材步驟
 

　　(1)取孵化至適當(dāng)胚齡(9~12天)的胚蛋，用照蛋燈在暗處燈檢，若有豐富血管、胚體有運(yùn)動(dòng)的胚蛋，說(shuō)明胚體發(fā)育良好，并用有色筆劃出氣室和胚體位置。
 

　　(2)將胚蛋置于蛋架上，先用溫水清洗蛋殼，再用75%酒精棉球擦干；
 

　　(3)經(jīng)碘酒、75%酒精消毒后，在無(wú)菌條件下采用無(wú)菌法用剪刀或中號(hào)鑷子打開(kāi)氣室，沿氣室邊緣去除蛋殼；
 

　　(4)用眼科鑷撕去殼膜，暴露出雞胚；
 

　　(5)用彎頭鑷輕挑起胚頭，取出胚胎，放入無(wú)菌平皿中，解剖取材。
 

　　以上關(guān)于原代細(xì)胞的取材介紹到這里，有需要的小伙伴可以收藏起來(lái)！