上海遠(yuǎn)慕生物現(xiàn)貨供應(yīng)【進(jìn)口 國(guó)產(chǎn)】ELISA試劑盒，詳細(xì)講述大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒的操作流程，信息說(shuō)明，注意事項(xiàng)及其他咨訊，本司所供應(yīng)的ELISA試劑盒品種齊全，包含大鼠，小鼠，人，馬，猴，魚，鴨，雞，兔，植物，狗，豬，羊，植物，豚鼠及其他種屬等，價(jià)格實(shí)惠，歡迎訂購(gòu)!
大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒操作流程
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【信息說(shuō)明】
中文名：大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒
別名：大鼠降鈣素(CT)ELISA Kit
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個(gè)月
樣本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點(diǎn)：敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。
用途：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
檢測(cè)原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
【樣本收集保存】
1、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3、細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5、保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
【操作流程】
1、待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
2、酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
3、洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后，即甩去)，之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4、陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
5、酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
6、洗板，同(4)。
7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8、酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
9、洗板，同(4)。
10、每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
11、每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
12、分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2)，以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13、數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
【注意事項(xiàng)】
1、不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同，務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作，否則容易產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不確定性.
2、若不同批號(hào)人ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液)，或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用，有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高，花板等情形。
3、反應(yīng)時(shí)間的誤差，做大量標(biāo)本時(shí)，一孔和后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。
4、臨界值附近標(biāo)本波動(dòng)為正常現(xiàn)象，任何試劑均不可避免?？梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
5、加樣時(shí)樣品量誤差，對(duì)于陰或很陽(yáng)的標(biāo)本影響不大，但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響極大，建議校對(duì)加樣器。
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