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【信息說明】
產(chǎn)品名稱：改良番紅O-固綠軟骨染色液
供應商：遠慕生化試劑廠家
規(guī)格：5×50ml/5×100ml
分類：骨組織染色
儲存條件：室溫,避光,6個月
用途：軟骨染色
注意事項：主要由固綠染色液和番紅O染色液組成。染色時,注意分化時間,否則容易導致過染或脫色
【操作步驟】
1、標本的處理：10%福爾馬林固定、脫鈣、石蠟切片。
2、常規(guī)脫蠟至水。
3、入新鮮配制的Weigert染液染色3-5min。
4、酸性乙醇分化液分化15s。
5、蒸餾水洗1min。
6、在固綠染色液內(nèi)浸染5min，蒸餾水洗1min。
7、入SafraninOstain內(nèi)浸染1-2min，蒸餾水洗1min。
8、用乙酸溶液洗滌切片1-2min，以便去除殘留的固綠，蒸餾水洗1min。
9、分別用95%乙醇、無水乙醇脫水。
10、二甲苯透明，光學樹脂封固。
【注意事項】
1、需要顯示細胞核時，盡量采用鐵蘇木素染色，其著色力強色調(diào)濃，一般的蘇木素著色力不強。
2、Weigert蘇木素染液不可預先配制后放置，配制好后一般24h失去染色能力。
3、切片在SafraninOstain中染色不宜過長，否則易導致背景的深紅色不易分化掉。
4、切片分化時間應恰當，以背景呈綠色為宜。
5、SafraninOstain染色后，不宜在低濃度乙醇脫水，否則易褪色。
6、95%乙醇脫水時間不宜過長。
7、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
【染色原理】
改良番紅0-固綠軟骨染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅O結(jié)合呈現(xiàn)紅色，嗜酸性的骨和酸性染料固綠結(jié)合而成綠色或藍色，與呈現(xiàn)紅色的軟骨對比鮮明，從而將軟骨組織和骨組織區(qū)分開。番紅O是一種結(jié)合多陰離子的陽離子染料，其顯示軟骨組織是基于陽離子染料與多糖中陰離子基團(硫酸軟骨素或硫酸角質(zhì)素)結(jié)合。
番紅O著色與陰離子的濃度近似成正比關(guān)系，間接反映了基質(zhì)中蛋白多糖的含量和分布。當軟骨受到損傷時，軟骨中的糖蛋白會釋放出來，使基質(zhì)成分分布不均勻，從而導致番紅O淡染或不著色。通過圖像分析軟件可對番紅O染色的軟骨基質(zhì)進行定量分析。固綠與膠原纖維結(jié)合，不宜褪色。番紅O-固綠染色的分化很關(guān)鍵，分化過度易導致切片不著色，分化不足易導致切片著色過深。
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