【 總RNA提取試劑(Trizol )】特點(diǎn)_簡介說明_操作步驟等咨訊由上海遠(yuǎn)慕生物提供講述，本司是家專業(yè)從事科研試劑的老牌商家，所供應(yīng)的試劑品種齊全，價(jià)格便宜，包含ELISA試劑盒，動(dòng)物血清，標(biāo)準(zhǔn)品，對照品，培養(yǎng)基，抗原，抗體，多肽，酶類，染色液，溶液，緩沖液，實(shí)驗(yàn)耗材，生化試劑，化學(xué)試劑及其他系列，有進(jìn)口及國產(chǎn)品牌之分，歡迎訂購!
【特點(diǎn)】
RNA完整性好。
純度高，回收率高。
方便快捷，全過程僅需30 min左右。
【簡介說明】
本試劑是一種通用的總RNA提取試劑，適用于動(dòng)植物細(xì)胞或組織及細(xì)菌的總RNA抽提，可有效防止RNA在提取過程中的降解。獲得的RNA可直接用于Northern雜交，純化mRNA，體外翻譯，RNase保護(hù)實(shí)驗(yàn)，RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。該試劑可用于100次總RNA提取(10平方厘米細(xì)胞或100mg組織)。
【操作步驟】
1、樣品處理：
a、植物組織：取新鮮或-70℃凍存100mg組織在液氮中研磨，把粉末加入到1ml裂解液中混勻。
b、動(dòng)物組織：取新鮮或-70℃凍存100mg組織加1ml裂解液，用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。
c、貼壁細(xì)胞：直接在培養(yǎng)板中加入裂解液裂解細(xì)胞，每106細(xì)胞加1ml裂解液。用取樣器吹打混勻。
d、細(xì)胞懸液：離心收集細(xì)胞。每106動(dòng)物、植物和酵母細(xì)胞或每107細(xì)菌細(xì)胞加1ml裂解液混勻。
e、血液處理：取0.2-1ml新鮮血液加3倍體積紅細(xì)胞裂解液，混勻后室溫放置10分鐘，10000rpm離心1分鐘。棄上清，若沉淀含有紅細(xì)胞，可加入2倍體積紅細(xì)胞裂解液重復(fù)裂解步驟。離心后沉淀加入1ml裂解液混勻。
2、將處理后的樣品在室溫放置5分鐘，使得核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3、向勻漿樣品中加0.2mllv仿，蓋好管蓋，劇烈振蕩15秒，室溫放置3-5分鐘。
4、2-8℃12000rpm離心10分鐘。RNA主要在上層無色的水相中，把水相轉(zhuǎn)移到新管中，不要吸到沉淀。
5、吸附柱前處理：在吸附柱中加入500ul洗柱液，室溫放置2分鐘，2-8℃12,000rpm離心2min，棄廢液。
6、第4步收集的上清中加入200ul無水乙醇混勻，加入吸附柱靜置2分鐘，2-8℃12000rpm離心2min，棄廢液。
7、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，2-8℃12,000rpm離心2min，棄廢液。
8、向吸附柱中加入600ul漂洗液，2-8℃12,000rpm離心2min，棄廢液。
9、12000rpm離心2min，棄掉收集管，將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘將吸附柱中殘余的漂洗液去除。
10、將吸附柱放入新管中，向膜中央滴加50-100ulRNasefreeddH2O，室溫放置5min，12000rpm室溫離心2min即得到RNA。
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