上海遠幕生物現(xiàn)貨供應(yīng)藍色-瓊脂糖凝膠 CL-6B，藍色-瓊脂糖凝膠 6FF ，紅色-瓊脂糖凝膠 6FF，肝素-瓊脂糖凝膠 6FF，肝素-瓊脂糖凝膠 H.P.，谷胱甘肽-瓊脂糖凝膠 4B不同型號的瓊脂糖凝膠，詳細講述藍色-瓊脂糖凝膠 CL-6B使用說明等咨訊，了解更多瓊脂糖凝膠產(chǎn)品請!
藍色-瓊脂糖凝膠 CL-6B參數(shù)說明
中文名：藍色-瓊脂糖凝膠 CL-6B
英文名： Blue Sepharose CL-6B
供應(yīng)商：上海遠慕
規(guī)格：25ml、100ml
工作PH值：3-12
操作溫度：4-40℃
結(jié)構(gòu)成分：6%交聯(lián)瓊脂糖
保存條件：4℃
性狀：白色微球，凝膠狀，保存在20%酒精溶液中
應(yīng)用：蛋白、多肽、多糖的分離、分子量測定等
藍色-瓊脂糖凝膠 CL-6B使用說明
藍色-瓊脂糖凝膠 CL-6B操作步驟
1、裝柱：
a、讓所有的材料和試劑達到室溫。配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。
b、根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始緩沖液(按凝膠：緩沖液=3：1的比例)配成勻漿。
c、將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜)，務(wù)必使底端無氣泡。
d、用玻璃棒引導勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。
e、打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過，使柱床穩(wěn)定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
2、平衡：
讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導和pH不變。平衡液是低濃度的緩沖溶液，如Tris 、PBS等。
3、上樣：
a、樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。鹽濃度太大的樣品處理后再配。
b、一般情況是讓目標產(chǎn)品結(jié)合在柱子上，用平衡液洗去雜質(zhì)，再選擇一種洗脫液洗下目標產(chǎn)品。
c、介質(zhì)對樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質(zhì)、流動相的離子強度和pH值。鹽濃度小，介質(zhì)對樣品組分吸附較牢。用DEAE介質(zhì)時，推薦的pH值是大于目標產(chǎn)品等電點1個單位。
4、洗脫：
DEAE介質(zhì)可用增大鹽濃度或減小pH值進行洗脫，常用增大鹽濃度的辦法洗脫。
5、再生:
一般用高鹽濃度的緩沖液(含1~2mol/L NaCl)洗或減小pH洗10倍以上柱體積，接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用;若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時洗不掉，可用在位清洗(CIP)除去。
6、在位清洗:
a、對于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白，可以用2M Nacl去除。
b、對沉淀蛋白、對以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類，可用1M NaOH 去除。
c、對強疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等，用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，但要注意有機溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡;清洗完畢后，用至少3倍緩沖液平衡柱子。
7、注意：
在裝柱、使用和保存柱子的時候，要避免柱子流干，氣泡進入;在使用過程中，不能使用強酸，如使用酸洗，應(yīng)使用濃度低于0.1 M的冰醋酸。
8、去熱源：
用0.5M的*清洗柱子5~6小時或用0.1M的*24小時?；蛴靡韵路椒ú襟E去除：
a、2倍柱體積的70%乙醇;
b、2倍柱體積50mM Tris-HCl pH7.5;
c、1倍柱體積4M尿素;
d、3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M Nacl;
e、以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。
9、消毒:
用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。
10、滅菌:
置介質(zhì)于高壓滅菌鍋中120℃下30分鐘。
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